معرفی دستگاه StepOne
در دنیای مدرن بیولوژی مولکولی و تشخیص بالینی، تکنولوژیهای دقیق و پیشرفته برای شناسایی و تجزیهوتحلیل اسیدهای نوکلئیک DNA و RNA اهمیت بسیاری دارند. یکی از این تکنولوژیها، دستگاههای Real-Time PCR است که به کاربران این امکان را میدهد تا با دقت و حساسیت بالا، تغییرات کمی و کیفی در نمونهها را اندازهگیری کنند. یکی از مدلهای محبوب و پرکاربرد در این زمینه، دستگاه Real-Time PCR StepOne از شرکت Applied Biosystems است. در این مقاله به معرفی این دستگاه، ویژگیها، کارکرد و نحوه کالیبراسیون آن پرداخته میشود.
دستگاه StepOne از کمپانی Applied Biosystems یک سیستم Real-Time PCR ساده و کاربرپسند است که به طور خاص برای محققان تازهکار در زمینه PCR طراحی شده است. این دستگاه با سه رنگ فلورسانس و ظرفیت ۴۸ حفرهای، امکان انجام آزمایشهای کمی دقیق را فراهم میکند. طراحی ساده و نرمافزار کاربرپسند دستگاه، آن را به ابزاری ایدهآل برای آزمایشگاههای تحقیقاتی و تشخیصی تبدیل کرده است که نیاز به نتایج سریع و قابل اعتماد دارند.
ویژگی های دستگاه StepOne
با ارائه عملکرد بالا و قیمت مناسب، انتخابی عالی برای آزمایشگاههایی است که به دنبال تجهیزاتی با کیفیت و اقتصادی هستند. این دستگاه قابلیت اجرای سریع (کمتر از ۴۰ دقیقه) و استاندارد (کمتر از ۲ ساعت) را دارد، که باعث کاهش زمان مورد نیاز برای دستیابی به نتایج میشود. نرمافزار همراه دستگاه نیز بهگونهای طراحی شده که کاربران به راحتی بتوانند دادهها را تحلیل و نتایج را تفسیر کنند. این دستگاه، با طراحی ساده، عملکرد بالا و قابلیتهای پیشرفته، یک انتخاب مناسب برای محققان و آزمایشگاههایی است که به دنبال دقت، سرعت و سهولت در انجام آزمایشهای Real-Time PCR هستند. این دستگاه نه تنها در تشخیص بیماریهای عفونی و ژنتیکی نقش مهمی ایفا میکند، بلکه در تحقیقات علمی و توسعه داروها نیز کاربرد گستردهای دارد.
آخرین مطالب
یکی از نقاط قوت دستگاه StepOne، سادگی و راحتی در استفاده از آن است. نرمافزار کاربرپسند دستگاه، کاربران را در طراحی و اجرای آزمایشها یاری میکند. همچنین، این دستگاه دارای راهنمایهای گرافیکی و تعاملی است که کاربران را در طی مراحل مختلف آزمایش راهنمایی میکند. دستگاه StepOne با استفاده از فناوریهای پیشرفته در سیستم اپتیکی و تشخیص فلورسانس، قادر است با دقت و حساسیت بسیار بالا، نتایج آزمایش را گزارش دهد. این ویژگی بهویژه برای شناسایی مقادیر بسیار کم از اسیدهای نوکلئیک در نمونهها اهمیت دارد.
دستگاه StepOne مجهز به نرمافزار StepOne Software است که ابزارهای مختلفی برای تجزیهوتحلیل دادهها ارائه میدهد. این نرمافزار به کاربران اجازه میدهد تا نتایج را به صورت گرافیکی مشاهده کنند و گزارشهای دقیقی از نتایج به دست آورند، همچنین دستگاه دارای ابعاد کوچکی است که باعث میشود فضای زیادی را در آزمایشگاه اشغال نکند. این ویژگی بهویژه برای آزمایشگاههای کوچک و یا مراکزی که نیاز به استفاده از فضای محدودی دارند، بسیار مفید است.
کارکرد دستگاه StepOne
- آمادهسازی نمونه:
- اولین مرحله در کار با دستگاه StepOne، آمادهسازی نمونههاست. این مرحله شامل استخراج DNA یا RNA از نمونه مورد نظر (مانند خون، بافت، سلولها) و تهیه مخلوط واکنش است. مخلوط واکنش معمولاً شامل پرایمرها، پروبهای فلورسانس، آنزیم Taq polymerase و بافرهای مورد نیاز برای واکنش PCR است.
- بارگذاری نمونهها در دستگاه:
- پس از آمادهسازی نمونهها، آنها در چاهکهای مخصوص دستگاه StepOne قرار میگیرند. دستگاه StepOne دارای بلوک حرارتی است که میتواند به طور همزمان دمای تمام چاهکها را کنترل کند و واکنشهای PCR را به طور دقیق اجرا کند.
- راهاندازی واکنش:
- پس از بارگذاری نمونهها، کاربران با استفاده از نرمافزار StepOne، برنامه واکنش PCR را تنظیم میکنند. این برنامه شامل مراحل مختلفی مانند دناتوراسیون (Denaturation)، اتصال پرایمرها (Annealing) و افزایش طول (Extension) است. در طول این مراحل، دستگاه فلورسانس تولید شده در هر چرخه را اندازهگیری میکند و نتایج را به صورت لحظهای نمایش میدهد.
- تحلیل دادهها:
- پس از پایان واکنش، نرمافزار StepOne دادههای فلورسانس را تجزیه و تحلیل میکند. این دادهها میتوانند برای تعیین مقدار نسبی یا مطلق DNA یا RNA در نمونهها مورد استفاده قرار گیرند. کاربران میتوانند نتایج را به صورت نمودارهایی مانند منحنیهای تکثیر و نمودارهای ذوب (Melting Curve) مشاهده کنند.
کالیبراسیون دستگاه StepOne
مراحل کالیبراسیون
آمادهسازی دستگاه: قبل از شروع کالیبراسیون، دستگاه باید تمیز و بدون هرگونه آلودگی باشد. صفحه کالیبراسیون باید در دمای اتاق برای مدت زمان مشخصی قرار گیرد تا به شرایط محیطی دستگاه عادت کند. ابتدا دستگاه را با استفاده از کابل سیستم StepOne به کامپیوتر متصل کنید. مطمئن شوید که کابل سیستم به پورت اترنت زرد دستگاه متصل شده و به پورت اترنت کامپیوتری که نرمافزار StepOne را اجرا میکند، وصل است.
کالیبراسیون پسزمینه (Background Calibration): این مرحله به منظور حذف نویز و سیگنالهای ناخواسته ایجاد شده توسط دستگاه یا مواد مصرفی است. انجام این کالیبراسیون به دستگاه کمک میکند تا تنها سیگنالهای معتبر ناشی از فلورسانس نمونهها را شناسایی و تفسیر کند. این مرحله به منظور تعیین سطح فلورسانس پسزمینه برای هر چاهک است. پسزمینه فلورسانس میتواند به دلیل مواد شیمیایی موجود در واکنش یا ناخالصیهای پلاستیکی وجود داشته باشد. کالیبراسیون پسزمینه به دستگاه کمک میکند تا سیگنالهای واقعی را از نویز جدا کند.
کالیبراسیون رنگ (Dye Calibration): برای تضمین اینکه دستگاه به درستی قادر به تشخیص و تفکیک طیفهای مختلف رنگهای فلورسنت است، کالیبراسیون رنگ انجام میشود. این کار با استفاده از نمونههای استانداردی که دارای رنگهای فلورسنت مشخص هستند انجام میشود و نیاز به دقت بالا در تنظیمات نوری و الکترونیکی دستگاه دارد. این فرایند برای تنظیم تشخیص رنگهای فلورسانتی استفاده شده در آزمایشها ضروری است. هر رنگ مشخصی که در واکنشهای PCR استفاده میشود نیاز به تنظیم دقیق دارد تا اطمینان حاصل شود که دستگاه میتواند فلورسانس را به درستی تشخیص دهد. این کالیبراسیون به خصوص برای جلوگیری از تداخل بین رنگها و بهبود دقت تفسیر نتایج مهم است.
تایید کالیبراسیون: پس از اتمام فرایند کالیبراسیون، نتایج باید بررسی و تأیید شوند تا اطمینان حاصل شود که دستگاه در محدوده مشخصات فنی قرار دارد. این کار اغلب شامل اجرای یک آزمایش کنترلی با پارامترهای شناخته شده است تا دقت دستگاه تأیید شود.
RNase P
آزمایش RNase P یکی از موارد مهم در کالیبراسیون و تایید عملکرد دستگاههای PCR زمان واقعی مانند دستگاههای تولیدی شرکت Applied Biosystems (ABI) است. این آزمایش برای ارزیابی دقت و عملکرد کلی دستگاه قبل از شروع به کار تجزیه و تحلیل نمونههای مهم و حساس استفاده میشود. RNase P یک آنزیم طبیعی است که در همه سلولهای زنده یافت میشود و نقش آن در پردازش RNAهای پیشساز مولکولی مهم است. در زمینه PCR زمان واقعی، استفاده از RNase P به عنوان یک نشانگر کنترل داخلی عمل میکند تا از حضور DNA نوکلئیک انسانی در نمونه اطمینان حاصل شود و به عنوان یک معیار برای تایید عملکرد صحیح دستگاه PCR زمان واقعی استفاده میشود.
تفاوت مدل های StepOne و StepOnePlus
- ظرفیت نمونه: StepOne دارای ظرفیت ۴۸ نمونه است، در حالی که StepOnePlus دارای ظرفیت ۹۶ نمونه است.
- دامنه دینامیکی: دامنه دینامیکی StepOnePlus وسیعتر از StepOne است که امکان تجزیه و تحلیل دقیقتری از نمونهها را فراهم میکند.
- پشتیبانی از Multiplexing: StepOnePlus از این ویژگی پشتیبانی میکند، در حالی که StepOne فاقد آن است.
- هزینه: StepOne ارزانتر از StepOnePlus است و برای آزمایشگاههایی که بودجه کمتری دارند، مناسبتر است.
کلام آخر
دستگاه Real-Time PCR StepOne یکی از ابزارهای قدرتمند و کارآمد در زمینه تشخیص و تحقیق در بیولوژی مولکولی است. این دستگاه با دقت و حساسیت بالا، امکانات نرمافزاری قدرتمند و طراحی کاربرپسند، انتخابی مناسب برای آزمایشگاههای مختلف است. آشنایی با کارکرد و کالیبراسیون این دستگاه، به کاربران این امکان را میدهد تا از تمامی قابلیتهای آن بهرهمند شوند و نتایج دقیق و قابل اعتمادی را به دست آورند. با استفاده صحیح از دستگاه StepOne، میتوانید به اهداف علمی و تحقیقاتی خود دست یابید و در مسیر پیشرفت علم و بهبود سلامت انسانها گام بردارید.
شرکت مولکولی ماناتک به عنوان یکی از شرکتهای معتبر در زمینه فروش، تعمیر و کالیبراسیون دستگاههای پیشرفته زیستمولکولی، از جمله دستگاه های step one و step one plus Real-Time PCR، شناخته میشود. این شرکت با بهرهگیری از تیمی متخصص و مجرب، خدمات گستردهای در زمینه تامین، نصب، تعمیرات و کالیبراسیون تجهیزات آزمایشگاهی ارائه میدهد.
مولکولی ماناتک با تعهد به کیفیت و دقت بالا، اطمینان حاصل میکند که تمامی دستگاهها و تجهیزات زیستمولکولی مطابق با استانداردهای بینالمللی عمل کنند. این شرکت با فراهم آوردن پشتیبانی فنی قوی و خدمات پس از فروش، به محققان و آزمایشگاهها کمک میکند تا عملکرد بهینه تجهیزات خود را حفظ کنند و نتایج علمی دقیق و قابل اطمینانی را به دست آورند.
از طریق ارائه خدمات تخصصی و قابل اعتماد، مولکولی ماناتک به یکی از انتخابهای برتر در بازار تجهیزات زیستمولکولی تبدیل شده است و به عنوان یک شریک استراتژیک برای آزمایشگاهها و موسسات تحقیقاتی در ایران شناخته میشود.